1650362154466972138

实时荧光定量PCR的检测方法

2022年07月22日


实时荧光定量PCR ( PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。·

PCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。

所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。


检测方法

1.Ⅰ法:

在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。



2.探针法:

探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。

上一篇:国产替代趋势下 2022年后国产流式细胞仪发展潜力大
返回
下一篇:细胞计数仪,专业的细胞计数仪器,4大优势,个个突出

联系我们

仪器咨询:139 2234 2821(黄小姐)

仪器咨询:139 2212 2875(罗小姐)

仪器咨询:139 2210 4901(李小姐)

技术售后:139 2210 4902(侯先生)

返回顶部

客服热线

未标题-1
关注微信公众号

友情链接: 仪器交易网 | 中国生物器材网 | 仪器信息网 | 仪器批发网 | 仪表展览网 | 建材采购网 | 食品伙伴网 | 中国化工仪器网 | 中实仪器网 | 中国仪器网 | 仪器仪表交易网 | 阿仪网 | 仪表网 | 中国仪器仪表网 | 中国水处理设备网 | 网站之家 | 德瑞科仪(广州)科技有限公司 |

德瑞科仪(广州)科技有限公司© All Rights Reserved. 粤ICP备2022043594号